sgRNA文库产品介绍

一、产品类型与功能

1. ‌CRISPRko敲除文库‌
   • 通过sgRNA引导Cas9切割靶基因DNA双链，利用NHEJ修复机制引入移码突变实现基因敲除‌。
   • 适用于全基因组范围筛选与表型相关的关键基因‌。
2. ‌CRISPRa激活文库‌
   • 结合dCas9与转录激活因子（如VP64），上调靶基因表达水平，用于基因功能增益研究‌。
3. ‌CRISPRi干扰文库‌
   • 通过dCas9与抑制因子（如KRAB）融合蛋白，抑制靶基因转录，适用于基因功能缺失分析‌。
4. ‌物种特异性文库‌
   • ‌人源文库‌：覆盖19114个人类基因，含76441条sgRNA。
   • ‌小鼠文库‌：靶向20611个小鼠基因，含130209条sgRNA，支持肿瘤免疫等动物模型研究‌。
   • 人糖代谢基因敲除文库；人RNA结合蛋白敲除文库；人表观遗传敲除文库；小鼠代谢基因敲除文库等等；

二、服务流程与参数

1. ‌服务模块‌
   • ‌设计合成‌：根据基因名称/ID定制sgRNA序列，每条基因设计3-4条sgRNA以提高编辑效率‌。
   • ‌文库构建‌：将sgRNA克隆至慢病毒或质粒载体，构建转染级文库（周期5-7周）‌。
   • ‌质检交付‌：NGS验证文库覆盖度（>90%）和均一性（R²≥0.95），病毒滴度可达1×10⁸ IU/mL‌。
2. ‌配套工具‌
   • ‌Cas9稳转株‌：支持HEK293、Neuro-2A等细胞系的Cas9稳定表达，简化筛选流程‌。
   • ‌体外转录试剂‌：提供sgRNA体外转录模板设计及制备方案，适配不同实验需求‌。

三、核心优势

• ‌靶向精准‌：多重sgRNA设计降低假阴性率，靶点命中率显著高于传统筛选技术‌。
• ‌高通量覆盖‌：支持全基因组、代谢通路或功能基因集的定制化筛选，加速新靶点发现‌。
• ‌跨物种兼容‌：已成功应用于人、小鼠、植物及微生物等20余种模式生物‌。

四、适用领域

1. ‌基础研究‌：基因功能注释、信号通路解析、宿主-病原体互作机制等‌。
2. ‌转化医学‌：肿瘤治疗靶点挖掘、CAR-T免疫疗法优化、药物耐药性研究‌。
3. ‌农业生物技术‌：开发抗病/抗逆作物品种，提升育种效率‌

派维生物提供多种已验证的sgRNA质粒库、慢病毒库。